A utilização do metodo da cromatografia liquida de alta resolução ?

Quais as vantagens e desvantagens dessa utilização na purificação de principio ativos

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  • Para ler a matéria toda, acesse o link abaixo. Só consegui pesquisar sobre as vantagens.

    Abçs.

    Vantagens

    Com a CLAE se obtém, menor tempo de análise, alta resolução, resultados quantitativos de fácil resolução, boa sensibilidade, versatilidade, automatização e a segurança de ter um resultado de alta confiança.

    Limitações

    Os aparelhos da CLAE são de alto custo de instrumentação, alto custo de operação, análise qualitativa difícil e a falta de detector universal sensível, o que fatalmente acaba tendo um custo ainda maior, o de adquirir vários detectores, sem falar na necessidade de experiência no seu manuseio.

    Fase móvel

    Características

    As principais características que devem apresentar toda fase móvel para ser útil na CLAE são:

    Ser de alto grau de pureza, ou de fácil purificação

    Dissolver a amostra sem decompor os seus componentes.

    Não decompor ou dissolver a fase estacionária.

    Ter baixa viscosidade.

    Compatibilidade com o tipo de detector utilizado.

    Polaridade adequada

    Colunas

    Características

    Constituídas por um tubo de material inerte, de diâmetro interno uniforme e capaz de resistir as pressões em que será usado. O aço inoxidável está entre os materiais mais usados. Existem algumas feitas com vidro de paredes grossas, mas apresentam inconveniências como a de não se obter conexões adequadas e eficientes, entre o vidro e o metal, que resistam as altas pressões e temperaturas, sem vazamento

    Técnicas de enchimento

    Enchimento a seco por vibração para sólidos rígidos:

    Desengordurar a parede interna da coluna por lavagem com diclorometano, acetona e água. Esfregar o interior do tubo da coluna com solução de detergente quente, lavar bem com água e metanol e secar. Colocar o filtro poroso em uma extremidade da coluna e colocá-la na posição vertical de maneira que o filtro fique na extremidade inferior. Adicionar pequenas porções de recheio na coluna, cada de vez, através de um funil, suficiente para encher 3-6mm da coluna. Bater de leve a coluna sobre um banco de madeira, duas vezes por segundo, aproximadamente 100 vezes. Pode-se utilizar um vibrador mecânico. Girando a coluna, bater fracamente nos lados na altura em que estiver o nível do recheio. Bater verticalmente a coluna no banco durante 15 segundos. Adicionar nova porção do recheio e repetir as etapas anteriores. Quando a coluna estiver cheia, continue batendo fracamente por aproximadamente 3 minutos. Limpar o fim do tubo e colocar o outro filtro poroso.

    Enchimento por suspensão com alta pressão

    Degasificar o solvente escolhido, por aquecimento e agitação ou por ultra-som. Colocar o recheio (15% a mais do eu o necessário para encher a coluna) em um pequeno frasco de vidro. Adicionar a quantidade necessária de solvente e submeter a agitação (em banho de ultra-som ou magnético) para formar a suspensão. Desengordurar a parede interna da coluna por lavagem com diclorometano, acetona e água. Esfregar o interior do tubo da coluna com solução de detergente quente, lavar bem com água e metanol e secar. Colocar o filtro poroso em uma extremidade da coluna e colocá-la na posição vertical de maneira que o filtro fique na extremidade inferior. Colocar a suspensão no reservatório apropriado. Conectar a coluna ao reservatório. Aplicar a pressão necessária durante o per

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